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? ? 曲線繪制的使用工具 ? 以下所述中使用的曲線繪制軟件為Curve E xpert1.4, 各位老師們如有需要即可點擊此鏈接下載自行下載使用; ? 標準曲線的繪制 ? 可以采用各種繪圖軟件來繪制 ELISA 標準曲線,下面以“Curve Expert1.4”軟件為例,繪制 ELISA 標準曲線的方法如下; 1.啟動“Curve Expert” 2.X 軸輸入標準品的 OD 值(雙抗夾心輸入 OD-空白值),Y 軸輸入所對應的濃度值
實驗動物采血 在實驗研究中,經常會采集實驗動物血液用于分析和評估動物體內的生理和病理情況。根據不同的實驗設計和要求及動物的特性和生理差異,選擇合適的采血方法,可以減少動物傷害,提高實驗的成功率和結果的可靠性。今天小編給大家普及下實驗動物采血方法及采血管的選擇。 01 大鼠、小鼠采血方法 尾尖采血(剪尾采血) 采血方法:動物麻醉后并固定,將鼠尾在45-50℃溫水中浸泡數分鐘,也可用二甲苯等化學藥物涂擦,使局新血管擴張。擦干尾部,用酒
免疫印跡(Western Blot)在研究蛋白相關實驗中是關鍵技術,由于實驗周期較長、步驟繁瑣,影響因素較多,在實驗過程中經常會遇到各種難題。我們需要追根求源,查找并修復問題。今天我們講解下WB實驗中內參的選擇。 什么是內參及內參的作用 內參即是內部參照(Internal control),是指在組織和細胞中表達相對穩定的一類蛋白質,通常由管家基因編碼。這些蛋白質被用作檢測蛋白表達水平變化時的參照物,以確定實驗的準確性和可重復性。 在Western Blot實驗中,我們使用內參其實就是使用與內參對應的抗體來檢測內參的
細胞培養上清 ?、賹⒓毎囵B上清液吸入離心管中,在2-8℃下以1000×g離心20分鐘,除去細胞碎片和雜質,收集上清液備用, ?、跇颖颈4嬖?20℃或-80℃,避免反復凍融。 01 uniprot Q:那什么情況下需要測細胞裂解液,什么情況下是檢測細胞培養液上清呢? A:首先從細胞培養的形態(貼壁細胞、懸浮細胞)所檢測蛋白分泌表達位置: 在uniprot蛋白數據庫中Subcellular Location 欄
Trizol 法抽提待檢測細胞的RNA(推薦使用 TRIpure總RNA提取試劑 貨號:EP013),反轉錄為CDNA 后裔支原體 檢測引物PCR 檢測細胞支原體污染情況。 支原體檢測引物 Mycoplasma_F01 GGG AGC AAA CAG GAT TAG TAT CCC T Mycoplasma_R01 TGC ACC ATC TGT CAC TCT GTT AAC CTC 40 cycles,63
一、Uniprot蛋白數據庫介紹及使用詳解 Uniprot數據庫是資源最廣、信息最豐富的蛋白質數據庫,是查詢蛋白功能的首選數據庫。Uniprot數據庫由Swiss-Prot、TrEMBL和PIR-PSD三大子數據庫構成,數據主要來自于各物種基因組測序完成后得到的全基因蛋白質序列,并包含了很多來自文獻中的蛋白及其功能信息。尤其是swiss-prot 子數據庫,庫中蛋白質信息都是手工核對過的 ,非冗余, 有詳細注釋信息的蛋白數據。作為一名科研工作者,Uniprot數據庫的使用技能應該是必備的技能之一。 (1)UniProtKB(UniProt Knowledgebase)是蛋白質序列、
1、樣本RNA得率以及各類項目最低起始量 ? 各樣本Total RNA得率統計(僅供參考): 測序項目推薦起始量(起始量僅供參考,外泌體不允許18s/28s rRNA有峰): 表達譜芯片及小RNA測序體液樣本及外泌體項目起始量(僅供參考) ? 2、各類樣本準備指南 2.1 動物組織/臨床組織采集 ① 取新鮮組織,組織體積要小,盡量長寬高≤0.5cm,考慮到可操作性,所切組織塊的大小可參考綠豆顆粒的大小 ② 去除非研究的組織類型(如結締組織,脂肪組織等),如果是臨床病變組織的取材要正確判斷病變以及正常組織,應將病變組織
一、原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。 其原理是:當細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內存在的許多蛋白質-蛋白質間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內結合的蛋白質Y也能沉淀下來。 目前多用精制的prorein A預先結合固化在argarose的beads上,使之與含有抗原的溶液及抗體反應后,beads上的prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結
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